LABORATORIO N°1

¿QUE ES UN LABORATORIO?

Se entiende por laboratorio, el anexo escolar destinado para la realización actividades de tipo experimental, como un apoyo al proceso enseñanza-aprendizaje, que contribuye al desarrollo del alumno. Son objetivos de las actividades en los laboratorios escolares: I.  Fomentar en el alumno la formación de hábitos de trabajo, estudio, organización e investigación. II. Desarrollar en los alumnos, habilidades y destrezas en el uso y manejo de sustancias, material y equipo de laboratorio. III. Facilitar la adquisición del conocimiento teórico-práctico de metodología adecuada para el desarrollo de las actividades sugeridas en los contenidos programáticos de las asignaturas correspondientes. IV. Fomentar la auto disciplina y el sentido de colaboración entre los alumnos, docentes y laboratoristas. V. Desarrollar en el alumno una actitud científica ante los fenómenos de la naturaleza. VI. Proteger y acrecentar los bienes y valores que constituyan el acervo cultural de la escuela y hacerlos accesibles a la colectividad. VII. Buscar la proyección de las actividades de laboratorio en beneficio de la comunidad. Para el desempeño de su misión, todo laboratorio escolar debe organizar el trabajo y de acuerdo a las exigencias del tipo medio superior

MATERIALES

A continuación te describimos los materiales de laboratorio que son usados con mayor frecuencia:

Tubos de Ensayo: Instrumentos de laboratorio de vidrio, que se emplean para realizar los ensayos o pruebas de laboratorio. Además sirven para mezclar líquidos, para calentarlos cómodamente. Son los aparatos más corrientes e imprescindibles del laboratorio.

Gradilla: Material de laboratorio de madera o metal, que es empleado como soporte de tubos de ensayo.

Porta objetos: Son láminas de vidrio rectangulares donde se colocan las muestras para observar al microscopio.

Vaso de Precipitación: Material de laboratorio de vidrio, que se usa como recipiente y también para obtener precipitados, sirve para calentar y hervir líquidos. Llamado también Beacker.

Probeta Graduada: Instrumento de laboratorio de vidrio, que se emplea para medir el volumen de los líquidos.

Mortero: Material de laboratorio de porcelana o de madera, que se usa para moler o reducir el tamaño de las sustancias. Consta de dos partes: el mazo o pilón y el mortero propiamente dicho.

Mechero: Es un instrumento de vidrio o metal, destinado a proporcionar combustión. Los más usados son los alcohol y gas, principalmente, el de Bunsen.

Termómetro: Instrumento que mide la temperatura en grados centígrados o Fahrenheit.

Pinzas para tubos: Instrumentos de laboratorio de madera o metal, que se usan para coger los tubos de ensayo.

Microscopio: Aparato que nos ayuda a observar lo que no podamos ver a simple vista.

materiales utilizados en laboratorios.

Equipos y/o aparatos de laboratorio

El espectrofotómetro

Uno de los instrumentos principales del laboratorio de biología celular es el espectrofotómetro. Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática (de un largo de onda particular)  a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra. Esto le permite al fisiólogo realizar dos funciones:

1.      Nos da información sobre la naturaleza de la sustancia en la muestra.

2.      Nos dice cuanta cantidad de la sustancia que nos interesa está presente en la muestra. 

El espectrofotómetro mide la absorbencia de una muestra en los espectros de luz ultravioleta y visible (200 a 850 nm). El largo de onda es determinado por un prisma que descompone el rayo de luz de acuerdo al largo de onda escogido. Luego la luz pasa por una hendidura que determina la intensidad del haz. Este haz atraviesa la muestra y llega a un tubo fotográfico, donde es medido. La cantidad de luz que atraviesa la muestra es el porcentaje (%) de tramitancia. Podemos usar esta unidad o cambiarla a absorbencia usando la siguiente ecuación.

%T = - Log Abs.

El espectrofotómetro nos puede dar ambos valores a la misma vez, ahorrando la necesidad de hacer los cálculos. (Tramitancia= cantidad de luz que atraviesa la mezcla).

Una característica del instrumento es la necesidad de "blanquear" el aparato antes de cada lectura. Esto se hace colocando una cubeta con una solución control que tenga todos los componentes de la reacción menos la sustancia que va a ser medida en el instrumento y ajustando la lectura a cero absorbencia. El propósito de esto es eliminar el registro de absorbencia (background) que puedan presentar los demás componentes de la reacción a ese largo de onda particular. Todas las moléculas presentan absorbencia porque todas interfieren con el paso de la luz. Sólo que la absorbencia será óptima a un largo de onda de luz específico para cada tipo de sustancia. 

Cubetas

Las cubetas son unos viales de plástico transparente o cuarzo que dejan pasar la luz. Los mejores para trabajos de investigación son las de cuarzo porque su interferencia al paso de la luz es mínimo. Son más costosas inicialmente pero bien tratadas pueden ser reusables. Las de plástico vienen con distintas características. Por lo general son desechables, aunque pueden reusarse. El tipo de cubeta plástica a usar depende del rango de luz en el que se van a analizar las muestras. Vienen unas para luz visible, que son las más económicas,  y otras para el rango de visible a ultravioleta. Estas son más versátiles.

Ambos tipos de cubetas deben manejarse con cuidado para evitar rallazos sobre la superficie por donde pasa la luz. Si la cubeta está rallada, los rayos de luz que incidan en la zona se difractan y no pasan por la muestra, por lo que  puede dar lecturas de absorbencia erróneas. Esto es especialmente crítico cuando queremos determinar concentración en una muestra. Antes de tomar una lectura, debemos observar que la cubeta no tenga rallazos ni esté sucia. Si se ven marcas de polvo u otro tipo de sucio la cubeta debe limpiarse con papel tisú (Kimwipes). Si la cubeta se manipula mucho, debemos sostenerla usando papel tisú para evitar pegarle los aceites que normalmente tenemos en las manos. No debemos usar ningún otro tipo de papel para limpiar las cubetas, puesto que pueden soltar fibras que pudieran caer en la muestra o rallar la superficie.

Pipetas y pipeteadores

Usamos las pipetas para medir volúmenes de líquidos de forma más precisa que con una probeta. Y son más versátiles, sobre todo al manejar volúmenes pequeños.

Las pipetas de bulbo son útiles para medir volúmenes que no requieren de mucha precisión. Antes se usaban pipetas "Pasteur" de cristal a las que se les aditaba un bulbo de goma que se usaba para succionar el líquido. Ahora vienen en plástico desechable de una sola pieza y se consiguen con o sin calibración.

Las pipetas volumétricas vienen en distintos tamaños, desde 1 ml hasta 200 ml, y con distintas formas, de acuerdo al uso que se les dé. También vienen en distintos materiales como borosilicato y plástico, desechables o reusables, estériles o sin esterilizar. Algunas pueden ser esterilizadas en horno o autoclave. Para llenarlas se pueden usar bulbos de caucho,bombas manuales o eléctricas, o equipos de llenado. Las bombas eléctricas y los equipos de llenado son muy útiles si se está trabajando con múltiples muestras, pues minimizan la fatiga del técnico.

Las micro pipetas son extremadamente útiles en los laboratorios de biotecnología. Estas permiten medir con precisión volúmenes tan pequeños como 0.1 ml hasta 1 ml. Estas requieren de unos pipeteadores especiales que deben ser tratados con mucho cuidado para evitar que se descalibren. Los pipeteadores vienen de distintos tipos. La mayoría pueden servir muestras individuales. Pero vienen los que pueden servir muestras múltiples, por medio de multicanales: pipetas que sirven 8 o 12 muestras a la vez. Estas son muy útiles al hacer pruebas de ELISA, donde se practican diluciones seriadas múltiples, o para preparar reacciones de varias muestras distintas a la vez. Se usan en conjunto con platos de fosas múltiples.

 Las puntas de micro pipetas vienen con distintas características de acuerdo al uso que se les dé. Vienen con punta ancha, estrecha o aplanada, con o sin filtros contra aerosoles, estériles o sin esterilizar  y pueden ser esterilizadas en autoclave.

Aparatos de electroforesis

Estos son unas cámaras que contienen un circuito eléctrico expuesto a un líquido electrolítico, llamado amortiguador. El aparato se usa para separar mezclas de moléculas grandes de acuerdo a su carga y/o su tamaño. La técnica consiste en inocular la muestra en un medio semisólido, la fase estacionaria, que se somete a un campo eléctrico, en una cámara donde en un extremo se encuentra un filamento que actúa como polo positivo, y en el extremo opuesto hay otro filamento formando el polo negativo. Las moléculas con cargas netas positivas se moverán hacia el polo negativo y las de carga negativa se irán hacia el polo positivo. Luego de la muestra ser tratada apropiadamente dependiendo del tipo de electroforesis, las moléculas que viajen hacia uno de los polos se separarán por tamaño, viajando más en la fase estacionaria las moléculas más pequeñas. El tipo y concentración de la fase estacionaria dependerá del tipo de moléculas que nos interesa correr.

Centrífugas

Son muy útiles para precipitar células y moléculas. Vienen en distintos tamaños y con distintas capacidades en el manejo de muestras. Este aparato somete la muestra a fuerzas de aceleración que obligan a las moléculas a concentrarse en el fondo del envase utilizado, separándolas del medio en que se encuentran. Incluso, bajo ciertos métodos se puede generar un gradiente de concentraciones dentro del mismo tubo, separando distintas moléculas a distintos niveles o fases dentro del tubo. Con ayuda de jeringas, se puede perforar la pared del tubo y extraer del mismo sólo aquella fase donde se encuentren las moléculas de interés.

Entre las centrífugas que usaremos durante el semestre están la centrífuga refrigerada, que nos va a permitir separar células de los medios de cultivo. El rotor de esta centrifuga puede sostener tubos de 50 ml, pero puede ser intercambiado por rotores que sostienen botellas de cultivo.

La micro centrífuga es una versión más pequeña de la descrita anteriormente. Es compacta, se coloca sobre la mesa y procesa muestras de hasta 2 ml. Es muy útil para precipitar ADN y otras sustancias que se trabajan en volúmenes pequeños.

Equipo de cromatografía

Haremos varias cromatografias al final del semestre. En una cromatografía buscamos separar uno o varios tipos de moléculas, relativamente pequeñas, de una mezcla de sustancias o para purificar muestras. Existen varios tipos de cromatografías. La que se utilice dependerá del tipo de moléculas que buscamos aislar.

La cromatografía de capa fina es ideal para separar muestras pequeñas. Presenta dos componentes: una fase estacionaria y una fase móvil. La fase estacionaria consiste de una placa de vidrio o celulosa impregnada con polvo de silicato (vidrio molido extremadamente fino). Las muestras se colocan a un centímetro del borde inferior y se coloca en un tanque de revelado que contiene algún tipo de solvente en el fondo. La placa se coloca de forma que el solvente no toque directamente las muestras. La fase móvil consiste del solvente. El solvente a usarse dependerá de las propiedades químicas de los componentes de la mezcla.

El solvente sube por capilaridad por la superficie impregnada con las muestras. Los componentes de la mezcla comenzarán a migrar, según el grado de afinidad que tengan por el solvente y/o la fase estacionaria. Mientras más afín sea algún componente a la fase móvil, más rápido se moverá y más lejos llegará en su migración sobre la fase estacionaria.

En la cromatografía de columna se pueden separar volúmenes más grandes de muestras. También tiene una fase estacionaria que consiste de un tubo conteniendo un material que separa la mezcla analizada. Los amortiguadores que se usan para lavar la columna constituyen la fase móvil.

El empaque de las columnas puede separar moléculas por su tamaño, por sus interacciones iónicas o por interacciones hidrofóbicas. El tipo de empaque a usar dependerá de las propiedades de la muestra.

Existen otros tipos de cromatografía más sofisticados, que se usan en laboratorios de investigación y en procesos de manufactura en varios tipos de industrias. Nosotros nos limitaremos a los descritos anteriormente.

Microscopio

El microscopio

es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser vistos a simple vista. El tipo más común y el primero que se inventó es el microscopio óptico. Se trata de un instrumento óptico que contiene dos o más lentes que permiten obtener una imagen aumentada del objeto y que funciona por refracción. La ciencia que investiga los objetos pequeños utilizando este instrumento se llama microscopia.

Etiquetas para colocar a los reactivos

La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier análisis. En el laboratorio se dispone de distintos tipos de reactivos (sólidos, líquidos o disoluciones preparadas) tal y como se comercializan.

Leer más: http://www.monografias.com/trabajos93/materiales-e-instrumentos-laboratorio/materiales-e-instrumentos-laboratorio.shtml#ixzz3gjgU4Nox

                           

 REACTIVOS

La pureza de los reactivos es fundamental para la exactitud que se obtiene en cualquier análisis. En el laboratorio se dispone de distintos tipos de reactivos (sólidos, líquidos o disoluciones preparadas) tal y como se comercializan.

	Reactivos sólidos
Reactivos líquidos	Disoluciones preparadas

En general, las casas comerciales ofrecen un mismo producto con varias calidades. Es importante que cuando seleccionemos un reactivo su calidad esté en concordancia con el uso que se le va a dar.

clasificación

En el laboratorio de análisis se utilizan reactivos de calidad analítica que se producen comercialmente con un alto grado de pureza. En las etiquetas de los frascos se relacionan los límites máximos de impurezas permitidas por las especificaciones para la calidad del reactivo o los resultados del análisis para las distintas impurezas. Dentro de los reactivos analíticos pueden distinguirse tres calidades distintas:

• Reactivos para análisis (PA): Son aquellos cuyo contenido en impurezas no rebasa el número mínimo de sustancias determinables por el método que se utilice.

• Reactivos purísimos: Son reactivos con un mayor grado de pureza que los reactivos “para análisis” .

• Reactivos especiales: Son reactivos con calidades específicas para algunas técnicas analíticas, como cromatografía líquida (HPLC), espectrofotometría (UV)…

Hay reactivos que tienen características y usos específicos como los reactivos calidad patrón primario, que se emplean en las técnicas volumetricas, o los patrones de referencia.

 Etiquetado de los reactivos

Todo envase de reactivos debe llevar obligatoriamente, de manera legible e indeleble, una etiqueta bien visible que contenga las distintas indicaciones que se muestran en las siguientes figuras:

Etiqueta para un reactivo sólido

Etiqueta para un reactivo líquido

                            

Los pictogramas, las frases R de RIESGO y las frases S de SEGURIDAD aparecen en las etiquetas del producto informando sobre la peligrosidad del mismo.

               

PICTOGRAMAS DE PELIGROSIDAD

                                 

Frases R. Riesgos específicos atribuidos a las sustancias peligrosas

R1. Explosivo en estado seco

R10. Inflamable

R23. Tóxico por inhalación

R38. Irrita la piel

….

Frases S. Consejos de prudencia relativos a las sustancias peligrosas

S3. Consérvese en lugar fresco

S22. No respirar el polvo

S29. No tirar los residuos por el desagüe

S50. No mezclar con (especificar producto)

             

 Manejo de reactivos

Al trabajar con cualquier reactivo se deben tomar todas las precauciones necesarias para evitar la contaminación accidental del mismo. Para ello han de seguirse las siguientes reglas:

• Escoger el grado del reactivo apropiado para el trabajo a realizar, y siempre que sea posible, utilizar el frasco de menor tamaño.
• Tapar inmediatamente el frasco una vez extraído el reactivo, paraevitar posibles confusiones con otros frascos.
• Sujetar el tapón del frasco con los dedos; el tapón nunca debe dejarse sobre el puesto de trabajo.
• Evitar colocar los frascos destapados en lugares en que puedan ser salpicados por agua u otros líquidos.
• Nunca devolver al frasco original cualquier exceso de reactivo o de disolución.
• Mantener limpios y ordenados los estantes de reactivos y las balanzas. Limpiar inmediatamente cualquier salpicadura.
• Rotular cualquier disolución o frasco de reactivo cuya etiqueta original se haya deteriorado.

servicios

los servicios que debe tener un laboratorio de ciencias naturales,son los siguientes:

electricidad:

gases combustibles:

agua potable:

calefacción:

      

aire acondicionado:

NORMAS

Todos los laboratorios deben cumplir las siguientes normativas:

• Reglamento general del servicio público de gases combustibles
• Reglamento de aparatos a presión
• Reglamento de aparatos de elevación y manutención
• Reglamento de seguridad en máquinas
• Reglamento de instalaciones térmicas en los edificios
• Reglamento electrotécnico de baja tensión
• Reglamento de almacenamiento de productos químicos (y sus instrucciones técnicas complementarias MIE-APQ)
• Norma básica de la edificación
• Reglamento de instalaciones de protección contra incendios
• Reglamento de protección sanitaria contra radiaciones ionizantes
• Seguridad y salud en los lugares de trabajo
• Seguridad y salud para la utilización por los trabajadores de los equipos de trabajo

 PARA INGRESAR AL LABORATORIO

• Revise los antecedentes conceptuales y el protocolo de trabajo experimental correspondiente a la sesión previa al inicio de la misma.
• Llegue puntualmente a la sesión. Es sumamente importante aprovechar el tiempo disponible para el trabajo en el laboratorio. Si llega tarde, repórtese inmediatamente con el profesor responsable.
• Use zapatos cerrados, de piso y con suela antiderrapante. Use pantalón largo o falda mediana de fibra natural. Retírese todos los accesorios personales que puedan comprender riesgos de accidentes mecánicos, químicos o por fuego, como son anillos, pulseras, collares y sombreros. Si usa corbata, sujétela con un pisa corbatas o introduciendola a la camisa. Evite peinados con copetes; si usa copete o cabello largo, recójalo y colóquese el protector facial, gorro o escafandra. Evite usar mangas largas y anchas; en caso de usar manga larga y ancha, cúbrala y sujétela completamente con las mangas de la bata. Evite el uso de lentes de contacto; use anteojos. Mantenga las uñas recortadas y limpias.
• Use la bata cerrada durante toda la sesión y el protector facial, los monogogles, guantes y respirador en su caso. Colóquese la credencial a modo de gafete. Indique en la credencial su tipo sanguíneo e informe de alergias, padecimientos crónicos o uso de prótesis.
• Porte la bitácora de laboratorio. Esta debe contener la información sobre los reactivos y los cálculos para preparar las soluciones que serán empleadas en la sesión. También debe contar con los teléfonos de emergencia y con una tabla de los primeros auxilios, así como de las medidas de contingencia química más comunes. Asimismo, incorpore el protocolo del trabajo experimental y la Lista de Seguridad. Revise las medidas y el equipo de seguridad en el laboratorio.
• Recoja con prontitud el material y los equipos para el trabajo correspondiente. Se debe revisar el estado de la mesa de trabajo, del material y de los equipos recibidos. Reporte cualquier falla o irregularidad al Técnico responsable del laboratorio. El material se debe lavar y secar antes de ser usado. Consulte con el Profesor y con el Técnico responsable y revise la existencia de los reactivos a utilizar.
• Cuente con el material de uso personal que se enlista abajo para cada sesión experimental.

II. PARA PERMANECER EN EL LABORATORIO.

• Siga las medidas de seguridad necesarias con los equipos, materiales y reactivos de la sesión para prevenir accidentes. Esto incluye a los bancos de trabajo; éstos deben permanecer colocados bajo las mesas o junto a éstas o a las paredes.
• Tome sólo las cantidades de reactivos necesarios para el trabajo experimental y colóquelas en material de vidrio limpio y seco. Etiquete y rotule todos los recipientes donde coloque reactivos, productos y residuos. Siga las medidas de contingencia y mitigación en caso de accidente.
• Mantenga sólo el material requerido para la sesión sobre la mesa de trabajo. Los frascos de reactivos deben permanecer en las campanas. Los demás objetos personales o innecesarios deben guardarse o colocarse lejos del área de trabajo.
• No ingiera alimentos ni bebidas en el interior del laboratorio, a menos que lo indique el protocolo.
• No fume en el interior del laboratorio. Todas las fuentes de fuego o calor deben estar controladas.
• No reciba visitas en el interior del laboratorio. Evite las distracciones. Así puede evitar accidentes.
• Informe al Profesor responsable cuando le sea necesario salir del laboratorio durante la sesión. Repórtese al reincorporarse.

III. AL CONCLUIR LA SESION.

• Disponga de los residuos y de los reactivos no utilizados de la manera indicada por las normas. Consulte la Lista de Seguridad del Laboratorio. Los reactivos no usados no se devuelven a los frascos. Los frascos de reactivos puros deben regresarse al almacén.
• Lave el material y devuélvalo limpio y seco. Retire las etiquetas de los materiales que contenían reactivos, productos o residuos. Realice la entrega en orden y esperando su turno.
• Deje limpio y seco el lugar de trabajo. Coloque los bancos junto a las mesas o invertidos sobre éstas.
• Antes de salir del laboratorio retírese la bata y demás equipo de seguridad y guárdelo en una bolsa de plástico exclusiva para este uso. Los filtros del respirador se guardan en un recipiente hermético. La bata y los guantes deberá lavarse al final de cada sesión.

MATERIAL PERSONAL COTIDIANO OBLIGATORIO.

• Bata larga (a la rodilla o pantorrilla) de algodón 100% y manga larga, con botones. Se recomienda que sea blanca.
• Monogogles incoloros sin ventilación o con trampas.
• Anteojos neutros de seguridad de policarbonato o vidrio endurecido con protección lateral.
• Protector facial transparente de 20 cm de largo.
• Guantes de látex para manejar ácidos débiles y cetonas.
• Guantes de PVC para manejar ácidos y bases débiles.
• Guantes de neopreno para manejar ácidos y solventes alifáticos.
• Guantes de nitrilo para manejar solventes y derivados orgánicos.
• Guantes térmicos de algodón o asbesto (para materiales calientes y fríos).
• Respirador con filtros para: a) Vapores orgánicos y gases ácidos (código amarillo). b) Vapores orgánicos (código negro). c) Amoniaco y alcalinos (código verde obscuro). d) Humos (código violeta).
• Escobillones de varios tamaños.
• Fibra verde.
• Detergente bajo en fosfatos.
• Encendedor para mechero y/o cerillos.
• Franela de algodón limpia.
• Cinta para encubrir (masking tape) de 1.27 cm de ancho.
• Toallas absorbentes de papel.
• Rollo de papel higiénico blanco o caja de pañuelos desechables blancos.
• Rollo de papel aluminio.
• Marcador indeleble, preferentemente negro.
• Tijeras rectas.
• Percolador de 8 cm de diámetro.
• Embudo de plástico de 8 cm de diámetro.

Importancia del laboratorio

Leer más: http://www.monografias.com/trabajos93/materiales-e-instrumentos-laboratorio/materiales-e-instrumentos-laboratorio.shtml#ixzz3gkcV9uQn

Cibergrafía: 

http://www.juntadeandalucia.es/averroes/~04000134/fisiqui/practicasq/node2.html - (normas de investigación)

http://www.prevenciondocente.com/laboratorio.htm -( requisitos para un laboratorio)

http://www.uv.es/gammmm/Subsitio%20Operaciones/2%20REACTIVOS.htm-(reactivos)

https://youtu.be/zSKLCvp7o0w